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  • 細胞凍存和復(fù)蘇經(jīng)驗操作流程

    2017-10-11 細胞凍存和復(fù)蘇經(jīng)驗總結(jié)2016/11/29閱讀(53)細胞凍存過程對保持細胞狀態(tài)影響巨大,李記生物結(jié)合多年實踐,總結(jié)出如下實用的細胞凍存流程?!奥齼隹烊凇笔羌毎麅龃婕皬?fù)蘇的基本原則,這對zui大限度的保存細胞活力至關(guān)重要。目前細胞凍存多用甘油或二甲基亞砜(DMSO)作為保護劑,這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性;細胞凍存和復(fù)蘇時,減少細胞內(nèi)冰晶產(chǎn)生是關(guān)鍵。緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少細胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少冰晶對細胞的物理損傷。復(fù)蘇細胞采用快速融化的方法可以保證...
  • 溶酶體染色試劑盒的功能研究

    2017-09-22 溶酶體染色試劑盒液的配制,六孔板每孔所需JC-1染色工作液的量為1mL,其他培養(yǎng)器皿的JC-1染色工作液的用量以此類推,對于細胞懸液每50~100萬細胞需0.5mLJC-1染色工作液。取適量JC-1(200×),按照每50μLJC-1(200×)加入8mL超純水的比例稀釋JC-1。劇烈震蕩充分溶解并混勻JC-1。然后再加入2mLJC-1染色緩沖液(5×),混勻后即為JC-1染色工作液.溶酶體染色試劑盒發(fā)展過程中扮演重要角色。膜蛋白樣品的制備需要充分考慮到與下游的膠分析及質(zhì)譜分...
  • DNA定量試劑盒的應(yīng)用細節(jié)

    2017-09-06 DNA定量試劑盒靈敏度高,數(shù)據(jù)可靠,重現(xiàn)性好。操作簡便,省時省力。水溶性,不需要換液,尤其適合于懸浮細胞。無需放射性同位素和有機溶劑,對細胞毒性低。為1瓶溶液,毋需預(yù)制,即開即用。適合于高通量藥物篩選。DNA定量試劑盒樣本涵蓋,福爾馬林固定組織樣本(FFPE),其DNA損壞程度較重,激光顯微切割捕獲的樣本;提取自流式細胞的DNA;血漿或血清中的游離DNA;其他微量或非常珍貴的臨床樣本。DNA定量試劑盒系統(tǒng)檢測,標準曲線測定1次即可,如果儀器更換,則需要重新測定1次。如果熒光讀...
  • 溶酶體染色試劑盒的整體優(yōu)勢

    2017-08-18 溶酶體染色試劑盒是應(yīng)用新型的水溶性四唑鹽2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽快速高靈敏度檢測細菌活性的比色檢測產(chǎn)品。本四唑鹽在電子載體存在的情況下能夠被細菌的脫氫酶還原成橙黃色的水溶性的Formazan,生成的Formazan量與細菌的活性成正比。細菌活性越強,則顏色越深;細菌活性越弱,則顏色越淺。溶酶體染色試劑盒適用于從各類蛋白樣品中純化膜蛋白,包括動物、植物、細菌、真菌、酵母等蛋白粗樣品,純化過程簡單方便,可在1小...
  • 溶酶體染色試劑盒的應(yīng)用特點

    2017-08-03 溶酶體染色試劑盒對于懸浮細胞,取10~60萬細胞,重懸于0.5mL細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅加入0.5mLJC-1染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中37℃孵育20分鐘。在孵育期間,按照每1mLJC-1染色緩沖液(5×)加入4mL蒸餾水的比例,配制適量的JC-1染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。37℃孵育結(jié)束后,600g4℃離心3~4分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。溶酶體染色試劑盒是一類熒光成像工具,用來標記亞細胞,細胞器;例如細胞膜、溶酶體、...
  • 無毒、安全的核酸染料——李記GelRed

    2017-07-20 GelRed是一種結(jié)合于所有dsDNA雙螺旋小溝區(qū)域的具有*設(shè)計的熒光染料。在游離狀態(tài)下,GelRed發(fā)出微弱的熒光,但一旦與雙鏈DNA結(jié)合后,熒光大大增強。因此,GelRed的熒光信號強度與雙鏈DNA的數(shù)量相關(guān),可以根據(jù)熒光信號檢測出PCR體系存在的雙鏈DNA數(shù)量。GelRed與EB有相同的光譜特性,無需改變?yōu)V光片及觀察裝置。標準的EB濾光片或SYBR濾光片都適用,使用與觀察EB相同的普通紫外凝膠透射儀觀察即可,在300nm紫外光附近可得到*激發(fā)。GelRed的zui大吸收...
  • DNA定量試劑盒的檢測規(guī)程

    2017-07-04 DNA定量試劑盒結(jié)果判斷,如果Ct值=40,則實驗樣品的UUDNA含量(基因拷貝數(shù)/ml)<1×103。如果Ct值<40,則實驗樣品的UUDNA含量(基因拷貝數(shù)/ml)=M。檢測樣本中核酸陽性時,按實際結(jié)果報告;對可疑結(jié)果應(yīng)復(fù)查,需要時與臨床。注意事項,各標本沸水浴時間誤差不超過1分鐘。加樣時每加完一個要立即蓋上封閉好離心管。DNA定量試劑盒操作時,須戴手套。使用新鮮配制的染色工作液,務(wù)必不要超過2小時,且注意避光。建議使用塑料管配制染色工作液,而不是玻璃制品。孵育時,避免光...
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