EZ Trans Lipo細胞轉(zhuǎn)染試劑（脂質(zhì)體）

產(chǎn)品簡介
EZ Trans Lipo細胞轉(zhuǎn)染試劑（脂質(zhì)體）為李記生物新研發(fā)的細胞轉(zhuǎn)染試劑，EZ Trans Lipo以納米脂質(zhì)體包裹核酸通過特殊遞送機制，把外源DNA、RNA、siRNA轉(zhuǎn)入各類細胞，能轉(zhuǎn)染貼壁細胞、懸浮細胞，還可用于siRNA和shRNA的基因敲除實驗及基因表達研究。轉(zhuǎn)染效率高、細胞毒性低、適用細胞廣、性價比高等優(yōu)點。

產(chǎn)品型號：AC04L071

更新時間：2025-06-08

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問量：2362

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

細胞生物學(xué)

無血清培養(yǎng)基基因與細胞治療外泌體研究其他血液制品動物細胞培養(yǎng) 常用培養(yǎng)基平衡鹽溶液細胞增殖與毒性細胞轉(zhuǎn)染細胞凋亡支原體檢測與祛除細胞污染預(yù)防與清除細胞分離活體成像細胞染色報告基因細胞株細胞組織運輸保存無血清細胞存凍液

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品牌	其他品牌	CAS	/
貨號	AC04L071	規(guī)格	1mL
供貨周期	現(xiàn)貨	應(yīng)用領(lǐng)域	化工,生物產(chǎn)業(yè),綜合

EZ Trans Lipo細胞轉(zhuǎn)染試劑（脂質(zhì)體）

產(chǎn)品描述
EZ Trans Lipo細胞轉(zhuǎn)染試劑（脂質(zhì)體）（以下簡稱“EZ Trans Lipo"）為李記生物新研發(fā)的細胞轉(zhuǎn)染試劑，EZ Trans Lipo以納米脂質(zhì)體包裹核酸通過特殊遞送機制，把外源DNA、RNA、siRNA轉(zhuǎn)入各類細胞，能轉(zhuǎn)染貼壁細胞、懸浮細胞，還可用于siRNA和shRNA的基因敲除實驗及基因表達研究。
經(jīng)過對近百種細胞對比測試，EZ Trans Lipo在絕大部分受檢細胞的轉(zhuǎn)染效率、細胞毒性表現(xiàn)均與進口型產(chǎn)品一致或更優(yōu)；具備轉(zhuǎn)染效率高、細胞毒性低、適用細胞廣、性價比高等優(yōu)點。
訂購信息

產(chǎn)品名稱	貨號	規(guī)格	價格
EZ Trans Lipo細胞轉(zhuǎn)染試劑（脂質(zhì)體）	AC04L071	1 mL	1300

運輸與保存
藍冰運輸。4℃保存，有效期12個月。
使用方法
貼壁細胞（以293T細胞、96孔板為例）
1.細胞準備
轉(zhuǎn)染前一天用1酶消化、鋪板，轉(zhuǎn)染當天細胞密度達到3.0x10⁵ 個細胞/mL時可進行轉(zhuǎn)染, 細胞匯合度達到70%-80%，保證活細胞>90%。
2.準備DNA-EZ Trans Lipo復(fù)合物
（1）取兩支無菌EP管(平行樣)，兩個EP管各加入5 μL不含抗生素和血清的MEM細胞培養(yǎng)液，然后每一管各加入EZ Trans Lipo轉(zhuǎn)染試劑0.15 μL，輕微吹吸使混和均勻。
（2）取一支無菌EP管，加入10 μL不含抗生素和血清的MEM細胞培養(yǎng)液，然后加入待轉(zhuǎn)DNA或質(zhì)粒，確保最終DNA量為0.2 μg，輕微吹吸使混和均勻。
（3）分別吸取將上述含有DNA的培養(yǎng)液5μL加入稀釋好的EZ Trans Lipo的兩個EP管中, 輕輕吹打、晃動使混和均勻，室溫靜置20 min形成DNA-EZ Trans Lipo 復(fù)合物（室溫條件4 h內(nèi)性質(zhì)穩(wěn)定）。
3.轉(zhuǎn)染細胞
把DNA-EZ Trans Lipo 復(fù)合物全部加入到96孔板貼壁培養(yǎng)的293細胞中（試劑有重復(fù)樣）。逐滴分散加入，輕微晃動。
4.細胞檢測
加入DNA-EZ Trans Lipo復(fù)合物的細胞在 37℃ 培養(yǎng)1-3 d（無需特意更換培養(yǎng)液），根據(jù)實驗設(shè)計實時觀察或收獲細胞檢測。

表1：不同培養(yǎng)體積對應(yīng)的待轉(zhuǎn)DNA、EZ Trans、稀釋液用量

培養(yǎng)皿	96孔板	24孔板	12孔板	6孔板	6cm皿	10cm皿
推薦鋪板個數(shù)/孔	1-3x10⁴	0.5-2x10⁵	2-3x10⁵	0.5-1x10⁶	1-2x10⁶	2-4x10⁶
推薦轉(zhuǎn)染質(zhì)粒總量ug/孔	0.1μg	0.5μg	1μg	2μg	5μg	10μg
轉(zhuǎn)染試劑μL/孔	0.15μL	0.75μL	1.5μL	3.5μL	7.5μL	15μL
無血清培養(yǎng)基μL	20μL	50μL	100μL	200μL	500μL	1000μL

懸浮細胞（以293FT細胞、1mL培養(yǎng)體積為例）
1.細胞準備
細胞進行轉(zhuǎn)染當天，細胞密度達到2-2.5x10⁶個/mL時可進行轉(zhuǎn)染，細胞重懸后匯合度達到70%-80%，保證活細胞>90%。懸浮細胞細胞轉(zhuǎn)染可當天接種/鋪板, 只要細胞狀態(tài)穩(wěn)定即可進行。
2.準備DNA-EZ Trans Lipo復(fù)合物
（1）取兩支無菌EP管(平行樣)，兩個EP管各加入400μL不含抗生素和血清的MEM細胞培養(yǎng)液, 然每一管各加入EZ Trans Lipo轉(zhuǎn)染試劑15μL，輕微吹吸使混和均勻。
（2）取一支無菌EP管，加入800μL不含抗生素和血清的MEM細胞培養(yǎng)液，然后加入待轉(zhuǎn)DNA或質(zhì)粒，確保最終DNA量為20μg，輕微吹吸使混和均勻。
（3）分別吸取將上述含有DNA的培養(yǎng)液400μL加入到稀釋好的轉(zhuǎn)染試劑培養(yǎng)液的兩個EP管中, 輕輕吹打、晃動使混和均勻，室溫靜置20 min（室溫條件4 h內(nèi)性質(zhì)穩(wěn)定）。
3.轉(zhuǎn)染細胞
把DNA-EZ Trans Lipo復(fù)合物800μL全部加入到1 mL懸浮培養(yǎng)的293FT細胞中（有重復(fù)樣）。逐滴分散加入，輕微晃動。
4.細胞檢測
加入DNA-EZ Trans Lipo復(fù)合物的細胞，37℃ 懸浮培養(yǎng)細胞1-3 d（無需特意更換培養(yǎng)液），根據(jù)實驗設(shè)計實時觀察或收獲細胞檢測。
注意事項
1.本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
2.DNA-EZ Trans Lipo 的轉(zhuǎn)染過程不要求特意更換，但由于雙抗會影響重組蛋白的表達，為獲得最佳表達效果，建議在細胞轉(zhuǎn)染前2 h更換成不含抗生素和血清的培養(yǎng)基，在轉(zhuǎn)后4-6 h換回含抗生素和血清的培養(yǎng)基。
3.質(zhì)粒質(zhì)量：請務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級無內(nèi)毒素質(zhì)粒。通過260 nm光吸收測定DNA 濃度，260nm / 280nm比值確定 DNA 純度（比值應(yīng)該在1.8～2.0的范圍之內(nèi)）。如有可能，請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質(zhì)粒的完整性。
4.細胞條件：使用適當保存和經(jīng)常傳代的健康細胞。確保培養(yǎng)基沒有被細菌、真菌或支原體污染。如果細胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細胞，請在轉(zhuǎn)染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者李記生物的特級胎牛血清（Foetal Bovine Serum）（貨號：AC03L055）培養(yǎng)細胞。
5.為了減少操作誤差，上述操作步驟設(shè)定了一個重復(fù)平行樣，用戶可根據(jù)實驗室目的和實驗室條件調(diào)整。
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