公公的淫之手,华人黄网站大全,红杏亚洲影院一区二区三区,久久久精品456亚洲影院

免費咨詢熱線

021-50778506

技術(shù)文章

TECHNICAL ARTICLES

當前位置:首頁技術(shù)文章真核細胞轉(zhuǎn)染試劑說明書,高效轉(zhuǎn)染試劑使用方法

真核細胞轉(zhuǎn)染試劑說明書,高效轉(zhuǎn)染試劑使用方法

更新時間:2024-02-04點擊次數(shù):2319

EZ Trans細胞轉(zhuǎn)染試劑作為新一代的轉(zhuǎn)染試劑,其轉(zhuǎn)染原理是帶正電的陽離子聚合物與核酸中帶負電的磷酸基團形成帶正電的復合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用,并通過胞吞作用進入細胞。本產(chǎn)品經(jīng)過李記生物的優(yōu)化處理,具有轉(zhuǎn)染效率高,細胞毒性低,操作簡單,重復性好,適用范圍廣等特點。

以下為真核細胞轉(zhuǎn)染試劑說明書:

轉(zhuǎn)染試劑運輸與保存

藍冰運輸。4℃保存,有效期12個月。】:不可冷凍!

高效轉(zhuǎn)染試劑使用方法(以 24 孔板為例,其他培養(yǎng)皿中轉(zhuǎn)染請參考表1)

1. 接種細胞

對于貼壁細胞,轉(zhuǎn)染前18-24 h進行鋪板(不含抗生素),使其在轉(zhuǎn)染時的密度大約在80%左右。對于懸浮細胞,轉(zhuǎn)染當天,配制EZ Trans-DNA復合物之前進行鋪板,每500 µL生長培養(yǎng)基中加入4~8×105cells。  

【注】:培養(yǎng)液中的血清不影響轉(zhuǎn)染效率。轉(zhuǎn)染試劑使用量受細胞類型及其他實驗條件影響,建議初次使用時設(shè)置梯度進行優(yōu)化最佳使用量。

2. 準備EZ Trans-DNA復合物

(1)對于每孔細胞,將1 μg質(zhì)粒DNA稀釋到40 μL無血清的高糖DMEM培養(yǎng)基(或者OPTI-MEM Ⅰ 培養(yǎng)基),混勻。

(2)對于每孔細胞,將3 μL EZ Trans轉(zhuǎn)染試劑稀釋到40 μL無血清的高糖DMEM培養(yǎng)基(或者OPTI-MEM Ⅰ 培養(yǎng)基),輕輕混勻。

【注】:無血清的高糖DMEM培養(yǎng)基是稀釋液,不能使用含血清的培養(yǎng)基進行DNA和EZ Trans轉(zhuǎn)染試劑的稀釋。因為EZ Trans-DNA轉(zhuǎn)染復合物的形成過程不能含有血清。

(3)將稀釋好的EZ Trans轉(zhuǎn)染試劑盡快全部加入到已稀釋好的質(zhì)粒DNA中,輕輕混勻。

【注】:此混合的順序不能反向進行。

(4)室溫放置10-15 min,以形成EZ Trans-DNA復合物。

3. 轉(zhuǎn)染細胞

(1)將上述80 μL EZ Trans-DNA轉(zhuǎn)染復合物均勻滴入到含細胞的培養(yǎng)皿中。輕輕晃動培養(yǎng)皿或輕微振蕩,讓EZ Trans-DNA復合物分散均勻。

(2)在37℃,5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)6-18 h,去除含EZ Trans-DNA復合物的培養(yǎng)液,更換新的培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)至對轉(zhuǎn)入基因表達分析。

【注】:篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞株,轉(zhuǎn)染細胞24 h后,將細胞傳代至新鮮的生長培養(yǎng)基中(將細胞稀釋10倍以上),在37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中孵育24 h,加入篩選培養(yǎng)基。在有轉(zhuǎn)染抗性基因相匹配的藥物篩選條件下,約 1~2周可篩選到耐藥性克隆,在這期間需經(jīng)常更換含篩選藥物的生長培養(yǎng)基。

注意事項

  1. 本產(chǎn)品僅限于科學實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

掃碼加微信

服務熱線

021-50778506

上海市浦東新區(qū)紫萍路908弄

lsj0027@obiosh.com

Copyright © 2025和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司 All Rights Reserved    備案號:滬ICP備2023007219號-1

技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    管理登錄    sitemap.xml

精品视频一区二区三三区四区| 亚洲av无码成人精品区日韩| 无码成人性爽xo视频在线观看| 香蕉久久一区二区不卡无毒影院| 人人妻人人澡人人爽欧美精品| 嫖妓大龄熟妇正在播放| 国产av旡码专区亚洲av苍井空| 办公室的交易hd在线观看| 胸大喂奶h玩弄爽到失禁n| googlemap日本| 国产乡下妇女做爰| 午夜精品久久久久久久无码| 婷婷大伊香蕉五月天视频| 日韩毛片| 亚洲AV无码国产精品色在线看| 成全动漫视频在线观看| 各种少妇正面着bbw撒尿视频| 久久精品AⅤ无码中文字字幕蜜桃| 娇妻在客厅被朋友玩得呻吟| 又大又粗欧美黑人aaaaa片| 尺度最大的色情禁片| 欧美黑人添添高潮a片视频| 在厨房我撕开岳的丁字裤| 日本免费一区二区三区高清视频| 扶着小表妺的小屁股坐下来| 最近中文国语字幕在线播放| 性a欧美片| 欧美熟妇vivoe精品| 国产综合久久久久久精品| 闺房床榻粗喘h娇女| 欧美大片免费流量| 性xxxx欧美老妇胖老太| 久久久久人妻精品一区二区三区| 女医剃毛刮毛浓毛妇科检查| 日本xxxx69hd老师学生| 国产山东48老熟女嗷嗷叫白浆| 51精产一二三产区区别| 脱警花警服露大白乳| 日韩国产成人无码av毛片| 他底下好硬蹭着我想要| 亚洲国产精品sss在线观看av|